انتقال ژن fld سیانوباکتریایی به گیاه برنج به روش اگرو باکتریوم

نویسندگان

ابراهیم قریشی

مسعود توحیدفر

مطهره محسن پور

چکیده

تنش های غیرزنده مانند خشکی، شوری، دمای بالا، سمیّت شیمیایی و تنش اکسیداتیو تهدیدات جدی برای کشاورزی محسوب شده و اثرات نامطلوبی بر رشد و باروری گیاهان بر­جا می­گذارند. در این تحقیق به منظور انتقال ژن fld سیانوباکتریایی به گیاه برنج به روش اگروباکتریوم از سویه eha105 و حامل پلاسمید p6-ubi استفاده شد. این  ناقل حاوی ژن نشانگر باکتریایی مقاومت به استروپتومایسین، نشانگر گیاهی مقاومت به هیگرومایسین و ژن فلاودکسین (fld) است. فلاودکسین نقشی مشابه فرودکسین (fd) در گیاه ایفا کرده و هنگام وقوع تنش­های غیر­­زیستی با جلوگیری از وقوع اغتشاشات و بی­نظمی­­های موجود در چرخه انتقال الکترون و ایجاد فرم­های فعال اکسیژن به صورت آنتی اکسیدان عمل کرده و تحمل گیاه را افزایش می­دهد. در این تحقیق کالوس­های جنین­زای برنج رقم هاشمی که بافت هدف به­شمارمی­روند، در انتقال ژن مورد استفاده قرار گرفت.  پس از انجام مراحل تراریختی، کالوس­های تراریخت احتمالی به محیط باززایی حاوی 2/0 میلی گرم بر لیتر اسید نفتالین استیک، 2 میلی گرم بر لیتر کاینتین و 50 میلی­گرم بر لیتر هیگرومایسین منتقل شدند. برای ریشه زایی نیز از محیط ریشه زایی حاوی 2/0 میلی گرم بر لیتر اسید نفتالین استیک استفاده شد. گیاهان باززایی شده به لوله های حاوی محلول یوشیدا منتقل شدند. آنالیز واکنش زنجیره ای پلی مراز (pcr) برای گیاهان تراریخت احتمالی با استفاده از پرایمرهای fld نشان داد که این گیاهان حداقل یک نسخه از ژن را دارا هستند. آنالیز pcr برای ژن virg نشان داد که تعدادی از گیاهان تراریخت، فاقد آلودگی اگروباکتریومی هستند. در حال حاضر گیاهان تراریخت حاصل در گلخانه برای تولید بذر نگهداری می­شوند.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

انتقال ژن fld سیانوباکتریایی به گیاه برنج به روش اگرو باکتریوم

Abiotic stresses such as drought, salt, high temperature, chemical toxicity and oxidative stress are considered serious to agriculture and adversely affect the growth and reproduction of crops. Production of transgenic rice was studied utilizing Agrobacterium-mediated strain EHA105 and   p6-ubi vector. This vector contains spectinomycin resistance gene as bacterial selectable marker, hygromycin...

متن کامل

بهینه کردن انتقال ژن به واسطه اگروباکتریوم در گیاه دارویی زنیان با استفاده از ژن fld

به منظور بهینه کردن شرایط انتقال ژن به گیاه دارویی زنیان عوامل مختلف شامل رقت آگروباکتریوم، سویه آگروباکتریوم، نوع آنتی بیوتیک کشنده آگروباکتریوم، غلظت استوسرینگون و مدت زمان تلقیح بر روی تعداد گیاهان باززا شده با استفاده ازسازه ژنی p6U-Ubi-FVT دارای ژن انتخابیHPT و ژن fld بررسی شد. غلظت 20 میلی گرم در لیتر هیگرومایسین برای غربالگری سلول های تراریخت و جلوگیری از تولید کالوس در سلول های غیر ترار...

متن کامل

روش انتقال ژن به گیاه ترشک(Rumex acetosa L.)

در این مطالعه عوامل موثر بر انتقال ژن به گیاه ترشک مورد بررسی قرار گرفت. از اگرو باکتریوم، سویه  LBA4404 حاوی پلاسمید pBI121، وغلظتهای مختلف کانامایسین و زمان‌های مختلف تلقیح با استفاده از ریز نمونه برگ برای ارزیابی انتقال ژن گزارشگر gus  استفاده گردید. کشت قطعات برگ روی محیط کشت MS دارای 5/1 میلی‌گرم در لیترBAP و 75/0 میلی‌گرم در لیترIAA و غلظت‌های کانامایسین صفر، 10، 25، 50، 75 و 100 میلی گرم...

متن کامل

استفاده از روش تراریزش توأم برای انتقال ژن کولین اکسیداز به برنج

در این پژوهش به منظور تولید گیاه برنج تراریخته با ژن کولین اکسیداز با قابلیت حذف ژن نشانگر انتخابی، دو پلاسمید بیانی موسوم به pABRII-Chl  (ژن کولین اکسیداز حاوی پپتید راهنما برای تظاهر ژن در کلروپلاست) و pABRII-Cyt (بدون پپتید راهنما برای تظاهر ژن در سیتوپلاست) ساخته شد و سپس با استفاده از روش تراریزش توأم، به همراه پلاسمید pTRA132 حامل ژن مقاومت به هیگرومایسین(hph) ، به کالوس های جنین زایی که ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
پژوهشنامه اصلاح گیاهان زراعی

جلد ۸، شماره ۱۸، صفحات ۷-۱۵

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023